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O RealQ Fast 2x Master Mix Green oferece uma solução conveniente e de alta qualidade para fluxos de trabalho de PCR em tempo real baseados em corante. Com sua formulação otimizada, este master mix pronto para uso garante resultados sensíveis, confiáveis e rápidos, facilitados pela inclusão de 2Taq Hot Start DNA Polymerase.

Características

Configuração de reação à temperatura ambiente

Múltiplas opções para programas de PCR rápidos ou super-rápidos

Alta especificidade, estabilidade e reprodutibilidade


Descrição


A chave para o desempenho do RealQ Fast está no mecanismo mediado pela 2Taq Hot Start DNA Polymeras proporcionando controle preciso sobre a atividade enzimática. Este recurso evita amplificações indesejáveis em baixas temperaturas, minimizando o risco de amplificações inespecíficas.



Para equipamentos de PCR em tempo real que exigem um corante de referência como o ROX, a solução ROX separada está disponível, permitindo o ajuste dos níveis de ROX. Esta adaptabilidade garante compatibilidade com uma ampla gama de equipamentoss de PCR em tempo real, tornando o RealQ Fast uma escolha versátil para pesquisadores.

Detecção sensível e quantificação precisa

O RealQ Fast 2x Master Mix Green fornece detecção e quantificação sensíveis em uma ampla variedade de modelos de DNA, incluindo DNA genômico humano, DNA plasmídico e DNA bacteriano.





A eficiência e os limites de detecção do RealQ Fast 2x Master Mix Green foram avaliados usando qPCR visando PAH em uma faixa de diluição de 6 log de DNA genômico humano em um instrumento de PCR em tempo real ABI StepOnePlus. Os resultados obtidos demonstram uma eficiência de 101% e um limite de detecção de 0,001 ng (equivalente a 0,6 cópias do modelo diplóide). Essas descobertas atestam a alta sensibilidade e precisão do master mix. Resultados comparáveis foram observados para outros alvos genéticos humanos, bem como alvos plasmídicos e bacterianos, validando ainda mais o desempenho robusto do RealQ Fast em diversas aplicações.

Estabilidade à temperatura ambiente

A incorporação de um mecanismo mediado pela Hot Start no RealQ Fast 2x Master Mix permite que os usuários preparem reações até 72 horas antes do ciclo de PCR, sem comprometer o desempenho. Esse recurso não apenas oferece conveniência, mas também ressalta a estabilidade e a confiabilidade do master mix. O RealQ Fast oferece aos usuários um alto nível de flexibilidade, inspirando confiança em seu desempenho em uma ampla variedade de fluxos de trabalho.



A robustez do RealQ Fast 2x Master Mix Green foi avaliada por meio de qPCR visando Pthr1 em uma faixa de diluição de 16 a 0,2 ng/µl de DNA genômico humano. Numa análise comparativa, foram preparadas duas placas de 96 poços com mistura de reação, incluindo RealQ Fast 2x Master Mix, primers e modelo de DNA. Uma placa foi submetida a ciclagem de PCR imediata, enquanto a outra foi incubada à temperatura ambiente durante 72 horas antes da ciclagem. Ambas as placas mantiveram eficiência, R2 e formato de curva consistentes.

Redução do tempo de corrida

O RealQ Fast Green 2x Master Mix foi otimizado para fornecer detecção sensível e quantificação precisa mesmo quando é necessário um tempo de execução baixo. O RealQ Fast oferece um alto grau de flexibilidade no design do programa de PCR, mantendo a eficiência, alta especificidade e alta sensibilidade*.

*Para configurações que exigem um LOD baixo, recomenda-se utilizar os programas Padrão ou Rápido.



Uma faixa de diluição de DNA genômico humano de 5 log foi usada para avaliar o efeito da diminuição do tempo de ciclo. O gene Pthr1 humano foi amplificado com três programas diferentes (Standard, Fast e Super-Fast) no instrumento de PCR em tempo real ABI StepOnePlus. Os três programas produziram resultados semelhantes, com eficiências de 95 a 105% e um LOD de 0,01 ng. Notavelmente, o uso do programa Rápido resultou em um atraso de 0,5 valores Cq, enquanto o programa Super-Rápido resultou em um atraso de 1,5 valores Cq, em comparação com o programa Padrão.