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PCR Clean-up OneStep otimiza seus resultados de sequenciamento. Clean-up fornece resultados em 5 minutos.
Características:
-Protocolo rápido de 5 minutos.
-Não necessita de colunas Spin ou contas magnéticas.
-Tratamento melhora aplicações downstream, como sequenciamento de DNA e análise de SNPs.
-Ideal para a preparação de protocolos em construção de bibliotecas em sequeciamento de última geração (NGS).
Descrição:
O PCR CleanUp PureIT ExoZAP consiste em uma combinação equilibrada entre Exonuclease termolábil I (HL-ExoI) e fosfatase alcalina de camarão recombinante (rSAP).
O tratamento dos produtos da reação de PCR com o PCR CleanUp PureIT ExoZAP remove primers residuais, DNAs de fita única e inativa o excesso de dNTPs por defosforilação. Adicione o PCR CleanUp PureIT ExoZAP diretamente à reação contendo o produto amplificado da PCR. Após o tratamento a 37 °C por, no mínimo, 2 minutos, a PCR CleanUp PureIT ExoZAP se torna completamente inativada por aquecimento a 80 °C pelo menos por 3 minutos.
Protocolo:
Este protocolo funciona como guideline para o clean-up de 5 μl de produtos da PCR utilizando-se a PCR CleanUp PureIT ExoZAP:
- Remova a PCR CleanUp PureIT ExoZAP do freezer a -20 °C.
- Mantenha a PCR CleanUp PureIT ExoZAP sobre o gelo por todo o tempo.
- Agite bem e gradualmente suspenda a agitação.
- Incube a reação a 37 °C de 2 a 5 minutos para degradar os primers remanescentes e DNA de fita única e a fim de inativar nucleotídeos em excesso por defosforilação.
- Incube a 80°C de modo a inativar completamente a PCR CleanUp PureIT ExoZAP de 3 a 10 minutos.
- Os produtos purificados da PCR agora podem ser utilizados para aplicações seguintes, como sequenciamento de DNA, extensão de primers ou análise de SNP.
- Após o tratamento, os produtos da PCR podem ser armazenados a -20 °C.
*Se o tratamento do produto da PCR produzir um volume mais elevado, aumente proporcionalmente a quantidade de PCR CleanUp PureIT ExoZAP.
Embalagens:
Código | Reações |
---|---|
A620601 | 100 |
A620603 | 500 |
A620606 | 2500 |
A620607 | 5000 |
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